ZQP1710 直扩qPCR预混液(Ab,含UDG)
产品编码:ZQP1710
储存温度:-20 ± 5℃保存
有效期:2年
- 产品描述
雅心直扩qPCR预混液适用于未纯化的样本进行qPCR扩增。本产品具有很强的抗抑性,无需核酸纯化步骤,可使用咽拭子、口腔拭子和粪便拭子的原始样本作为模板直接进行qPCR荧光检测。本产品将qPCR所需的缓冲液和酶整合至一管中,加样方便、简单,无需额外的开盖/移液操作,提高了检测通量,降低了污染风险。同时引入dUTP/UDG防污染系统,避免气溶胶等污染,Heat-labile UDG在预变性阶段迅速失活,不会影响后续qPCR性能。2X Direct qPCR Master Mix中包含优化的缓冲体系和酶,适用于多种检测方法,同时适用于多重和快速体系。
- 产品组分
组分名称 |
包装规格 |
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ZQP1710100T(100 rxns) |
ZQP17101000T(1000 rxns) |
ZQP17105000T(5000 rxns) |
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2X Direct qPCR Master Mix *a |
1.3 mL |
13 mL |
65 mL |
注意:
- 包含qPCR缓冲液、热启动Taq DNA聚合酶和UDG。
- 质量控制
- 无色澄清液体。
- 无核酸内切酶、外切酶和RNase残留。
- 本产品经qPCR检测,通过功能性验证。
- 注意事项
- 样品使用前请混匀并瞬时离心至反应管底部。
- 所用试剂、耗材以及实验操作区需洁净,避免污染。
- qPCR实验流程(举例)
(1)配制如下反应混合液
组分 |
25 μL体系 |
Nuclease-free Water |
To 25 μL |
2X Direct qPCR Master Mix |
12.5 μL |
Primer/Probe Mix |
1 μL |
模板 |
X μL |
注意:
- 推荐引物终浓度0.3 μM,可根据实验需求在0.1 - 1 μM范围内调整或根据客户需求添加。
- 推荐探针终浓度0.1 μM,可根据实验需求在0.05 - 0.3 μM范围内调整或根据客户需求添加。
- 如需要多重qPCR反应,则根据需求进行引物浓度和模板浓度优化。
- 拭子的加样量推荐不超过总体积的20%,根据生物样本的不同和样本保存液的不同,加样量可能存在差异,可根据需求确定反应体系中的最佳加样量。
- 反应程序
推荐一(标准程序)
温度 |
时间 |
循环数 |
目的 |
95℃ *a |
1 min |
1 |
预变性 |
95℃ *a |
|
45 cycles |
变性 |
60℃ |
60 sec |
退火/延伸 |
推荐二(快速程序)
温度 |
时间 |
循环数 |
目的 |
95℃ *a |
30 sec |
1 |
预变性 |
95℃ *a |
|
45 cycles |
变性 |
60℃ |
15-30 sec |
退火/延伸 |
注意:
- 如模板结构比较复杂,可适当增加预变性和变性时间。
不同PCR仪器反应条件略有不同,首次使用时请进行条件优化和确认。