Cat. No.:ZQP1210
储存温度:-20 ± 5℃保存
复验期:3年
1. 产品描述
雅心HS PCR试剂盒包含HS Taq、优化的缓冲液和单独提供的乙酸镁,适用于常规DNA模板的PCR扩增,同时也适用于亚硫酸盐转化处理的DNA模板的PCR扩增。HS Taq是该试剂盒的一个关键组成部分,是一种纯度高、耐热性强、扩增速度快的高性能DNA聚合酶,与抗Taq抗体高亲和力结合,可在样品配制和体系升温阶段抑制由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq抗体在PCR反应最初的DNA预变性阶段已完全变性,不会影响后续PCR反应的正常进行。配合优化的缓冲液,可以保证PCR体系对亚硫酸盐转化后的DNA模板具有极高的扩增灵敏度和特异性。
2. 产品组分
组分 |
规格 |
体积 |
4X HS PCR缓冲液 |
4X |
250 mL |
HS Taq |
10 KU/mL |
12.5 mL |
乙酸镁 |
1 M |
5 mL |
3. 质量控制
Ø 无核酸内切酶、外切酶和RNase残留。
4. 注意事项
Ø样品使用前请混匀并瞬时离心至反应管底部。
Ø HS Taq中含有高浓度的甘油,吸取时需注意准确吸取。
Ø所用试剂、耗材以及实验操作区需洁净,避免污染。
5. 实验流程(举例)
(1)配制如下反应混合液
组分 |
体积 |
Nuclease-free Water |
To 20 μL |
4X HS PCR缓冲液 |
5 μL |
乙酸镁*a |
X μL |
引物F/R*a |
X μL |
DNA模板*a |
X μL (Total DNA:0.05-1000 ng) |
HS Taq |
0.25 μL |
注意*:
a. 乙酸镁、引物和模板用量根据客户需求优化调整。
b. 如需进行荧光定量PCR,需另外添加荧光染料。
(2)推荐反应程序
温度 |
时间 |
循环数 |
目的 |
94℃ |
60 sec |
1 |
预变性 |
94℃ |
15 sec |
30-45 cycles |
变性 |
67℃ *a |
30 sec |
退火/延伸 |
注意*:
a. 退火/延伸温度可以根据客户需求进行优化调整。
b. 不同PCR仪器反应条件略有不同,首次使用时请进行条件优化和确认。