Cat.No.:ZP020310
来源:基因工程生产,大肠杆菌表达
储存温度:-20 ± 5℃保存
复验期:2年
1. 产品描述
雅心HS Taq (for bisulfite-treated DNA)适用于亚硫酸氢盐处理后含有尿嘧啶的模板DNA的PCR扩增,保证PCR体系具有极高的扩增灵敏度和特异性。
本制品中Taq酶和抗Taq抗体有很强的亲和力,可在样品配制和体系升温阶段抑制由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq抗体在PCR反应最初的DNA预变性阶段已变性,不会影响后续PCR反应的正常进行。
2. 产品组分
组分 |
ZP020310-01 (250 U) |
ZP020310-02 (500 U) |
HS Taq (for bisulfite-treated DNA) (10 U/μL) |
25 μL |
50 μL |
10X HS Taq Buffer (Mg2+ plus) |
0.5 mL |
1.0 mL |
3. 活性定义
1单位(U)指在74℃,30 min内,以大马哈鱼精子DNA为模板/引物,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需要的酶量。
4. 质量控制
· 无核酸内切酶和外切酶残留。
· 无RNase残留。
· 10 U本产品经qPCR检测, E. coli基因组残留不高于10拷贝。
· 功能检测:25 μL PCR体系中加入0.5 U本酶,以亚硫酸氢盐处理后的Siha 细胞DNA为模板进行PCR反应。35个循环后将PCR产物进行1.5%琼脂糖凝胶电泳,染色后可见有单一的目标条带。
5.注意事项
· 所用试剂、耗材以及实验操作区需洁净,避免污染。
6.推荐使用方法(举例)
(1)配制反应体系
组分 |
体积 |
10X HS Taq Buffer (Mg2+ plus) |
5 μL |
dNTP Mixture(2.5 mM each) |
4 μL |
引物1(10 μM) |
2 μL |
引物2(10 μM) |
2 μL |
Template DNA |
Optional |
HS Taq (for bisulfite-treated DNA) (10 U/μL) |
0.25 μL |
ddH2O |
To 50 μL |
注意:
1)根据实验需要,酶可在0.1 - 0.5 μL之间调整。
2)体系中Mg2+终浓度为2 mM。根据实验需要,可用25 mM MgCl2,以0.2 - 0.5 mM为间隔向上摸索。
3)所用试剂加入前请充分融化并混匀。
4)50 μL体系推荐模板用量
模板种类 |
用量 |
基因组DNA |
10-100 ng |
质粒DNA |
0.01-10 ng |
λDNA |
0.5-10 ng |
cDNA |
1-5 μL(不超过反应体系的1/10) |