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ZP0910 Taq 2X Master预混液(含染料)

Cat. No.:ZP0910

储存温度:-20 ± 5℃保存

复验期:2年

 

1. 产品描述

雅心Taq 2X Master Mix (Dye plus)是经过优化的即用型2X预混液,包含Taq DNA polymerase、dNTPs、Mg2+和优化的缓冲体系,适合于常规PCR,模板可以是纯DNA溶液、菌落和cDNA产物等,是5 kb或更短模板的标准PCR的理想工具。使用该预混液只需额外加入引物、模板即可,加样方便、简单,无需额外的开盖/移液操作,提高了检测通量和结果的重现性。本产品中含有溴酚蓝染料,反应结束后可以直接电泳,使用方便。本产品中含有优良的保护剂,反复冻融5次和4℃存放3个月不影响使用,如长期保存,请置于-20℃。PCR产物的3'端带有A突出端,适用于T载体克隆。

 

2. 产品组分

组分

ZP0910-01

ZP0910-02

ZP0910-03

Taq 2X Master Mix (Dye plus)

1 mL

10 × 1 mL

50 × 1 mL

 

3. 质量控制

· 酶原料无核酸内切酶、外切酶和RNase残留。

 

4. 实验流程(举例)

(1)配制如下反应混合液

组分

体积

Nuclease-free Water

To 50 μL

Taq 2X Master Mix (Dye plus)

25 μL

引物1 (10 μM)

2 μL

引物2 (10 μM)

2 μL

模板DNA

X μL

注意:

1)基因组DNA模板使用量推荐10-200 ng;质粒DNA模板使用量推荐0.1-10 ng。

2)PCR反应体系在冰上配制可以减少在反应准备阶段发生的非特异扩增,有助于提高特异性。 

 

(2)反应程序

推荐一(标准程序)

温度

时间

循环数

目的

95℃ *a

5 min

1

预变性

95℃ *a

30 sec

   30-35

变性

55-65℃ *b

20 sec

退火

72℃ *c

30-60 sec/kb

延伸

72℃

10 min

 

终延伸

注意*:

a. 模板结构复杂 (如GC含量较高),可适当增加预变性和变性时间,有助于提高扩增效率。

b. 退火温度请参考引物的理论Tm值或者根据软件推荐,如需要可以3℃为间隔进行测试,寻找最佳的退火温度。

c. 通常,Taq酶的延伸时间为60 sec/kb,本产品经优化后可以缩短延伸时间至30 sec/kb。

不同PCR仪器反应条件略有不同,首次使用时请进行条件优化和确认。

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