ZP0910 Taq 2X Master预混液（含染料）
Cat. No.：ZP0910
储存温度：-20 ± 5℃保存
复验期：2年
1. 产品描述
雅心Taq 2X Master Mix (Dye plus)是经过优化的即用型2X预混液，包含Taq DNA polymerase、dNTPs、Mg2+和优化的缓冲体系，适合于常规PCR，模板可以是纯DNA溶液、菌落和cDNA产物等，是5 kb或更短模板的标准PCR的理想工具。使用该预混液只需额外加入引物、模板即可，加样方便、简单，无需额外的开盖/移液操作，提高了检测通量和结果的重现性。本产品中含有溴酚蓝染料，反应结束后可以直接电泳，使用方便。本产品中含有优良的保护剂，反复冻融5次和4℃存放3个月不影响使用，如长期保存，请置于-20℃。PCR产物的3'端带有A突出端，适用于T载体克隆。
2. 产品组分
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组分 |
ZP0910-01 |
ZP0910-02 |
ZP0910-03 |
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Taq 2X Master Mix (Dye plus) |
1 mL |
10 × 1 mL |
50 × 1 mL |
3. 质量控制
· 酶原料无核酸内切酶、外切酶和RNase残留。
4. 实验流程（举例）
（1）配制如下反应混合液
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组分 |
体积 |
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Nuclease-free Water |
To 50 μL |
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Taq 2X Master Mix (Dye plus) |
25 μL |
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引物1 (10 μM) |
2 μL |
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引物2 (10 μM) |
2 μL |
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模板DNA |
X μL |
注意：
1）基因组DNA模板使用量推荐10-200 ng；质粒DNA模板使用量推荐0.1-10 ng。
2）PCR反应体系在冰上配制可以减少在反应准备阶段发生的非特异扩增，有助于提高特异性。
（2）反应程序
推荐一（标准程序）
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温度 |
时间 |
循环数 |
目的 |
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95℃ *a |
5 min |
1 |
预变性 |
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95℃ *a |
30 sec |
30-35 |
变性 |
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55-65℃ *b |
20 sec |
退火 |
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72℃ *c |
30-60 sec/kb |
延伸 |
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72℃ |
10 min |
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终延伸 |
注意*：
a. 模板结构复杂 (如GC含量较高)，可适当增加预变性和变性时间，有助于提高扩增效率。
b. 退火温度请参考引物的理论Tm值或者根据软件推荐，如需要可以3℃为间隔进行测试，寻找最佳的退火温度。
c. 通常，Taq酶的延伸时间为60 sec/kb，本产品经优化后可以缩短延伸时间至30 sec/kb。
不同PCR仪器反应条件略有不同，首次使用时请进行条件优化和确认。
