K2-WGA01 通用型全基因组扩增试剂盒
Cat. No.：K2-WGA01
储存温度：-20 ± 5℃保存
复验期：2年
1.产品描述
雅心通用型全基因组扩增试剂盒是基于phi29 DNA Polymerase和随机引物的一种恒温扩增基因的技术，可以从少量样本中扩增出大量全基因组DNA。phi29 DNA Polymerase具有高保真性、高合成率和超强链置换能力，可以方便、快速、高效地得到稳定产量的基因组DNA扩增样品。该产品操作简便、快捷，恒温30℃反应即可，无需PCR仪。适用于各种来源的纯化基因组DNA，扩增产物可用于一系列下游应用，如定量PCR、多重PCR、文库构建、测序、基因分型等。
2.产品组分
试剂盒规格：100 T
|
组分 |
货号 |
K2-WGA01 |
|
Random primers (100 μM) |
WGA01-A |
2 × 800 μL |
|
phi29 DNA Polymerase (10 U/μL) |
WGA01-B |
100 μL |
|
10X phi29 Reaction Buffer |
WGA01-C |
400 μL |
|
dNTP Mix (10 mM) |
WGA01-D |
500 μL |
3.实验流程（举例）
（1）配制如下反应混合液
|
组分 |
体积 |
|
Random primers |
12 μL |
|
dNTP Mix (10 mM) |
4 μL |
|
phi29 DNA Polymerase (10 U/μL) |
1 μL |
|
10X phi29 Reaction Buffer |
2 μL |
|
genomic DNA*a |
1 μL |
|
Total |
20 μL |
注意*：
a.genomic DNA模板含量推荐10 ng-100 ng。
1.使用热循环仪进行恒温扩增，30℃孵育反应3 h后65℃失活酶。可设置程序如下。
|
温度 |
时间 |
循环数 |
目的 |
|
30℃ *a |
3 h |
1 |
DNA扩增 |
|
65℃ *b |
10 min |
1 |
酶失活 |
|
4℃ |
∞ |
- |
反应结束后短时间保存 |
注意*：
a.30℃反应时间可以根据需求调整，可延长至10-16 h。如用PCR仪保温，推荐打开热盖；如用水浴锅保温，推荐加入石蜡油液封，以防水分蒸发。
b. 由于phi29 DNA Polymerase具有DNA外切酶活性，所以强烈推荐反应结束后65℃保温10-20 min彻底灭活phi29 DNA Polymerase，以防干扰后续实验。
