MR0110 RNase抑制剂
Cat.No.：MR0110
来源：基因工程生产，大肠杆菌表达
储存温度：-20 ± 5℃保存
复验期：2年
1.产品描述
雅心Murine RNase Inhibitor由克隆有该酶编码基因的重组大肠杆菌生产，可与各种商业化的Taq DNA聚合酶、AMV或M-MuLV逆转录酶或噬菌体RNA聚合酶兼容使用。Murine RNase Inhibitor通过非共价键以1:1的高亲和力结合RNases A、B、C，特异性抑制这三种RNase的活性，但对RNase 1、RNase T1、S1核酸酶、RNase H或来自Aspergillus的RNase无效。鼠源RNase Inhibitor不含有人源RNase Inhibitor中对氧化非常敏感的两个半胱氨酸，显著提高了抗氧化能力，这使其在不适宜高浓度DTT的反应中更具优势，如qPCR。
适用于cDNA第一链合成、RT-PCR、体外转录、RNA提取等可能存在RNase干扰的实验。
2.产品组分
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组分 |
MR0110-01（2000 U） |
MR0110-02（10000 U） |
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RNase Inhibitor（40 U/μL） |
50 μL |
250 μL |
3.活性定义
1单位（U）指抑制5 ng RNase A 50%活性所需要的RNase Inhibitor的量。活性测定是通过抑制RNase A水解Cyclic 2’,3’-CMP的能力确定。
4.质量控制
· 无核酸内切酶、核酸外切酶和RNase污染。
· 40 U本产品经qPCR检测， E. coli基因组残留不高于10拷贝。
5.注意事项
· 避免起泡、剧烈搅拌等操作，防止产品失活。
· 本产品不抑制RNase 1、RNase T1、S1核酸酶、RNase H活性。
· 在反应体系中，RNase Inhibitor应在可能导致RNase污染的其他成分加入前加入。
6.逆转录实验（举例）
（1）在RNase free离心管中配制如下混合液。
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组分 |
体积 |
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5X RT Buffer |
4 μL |
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Oligo(dT)18（50 μM） |
1 μL |
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dNTP Mixture（各10 mM） |
1 μL |
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RNase Inhibitor（40 U/μL） |
1 μL |
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Reverse Transcriptase（200 U/μL） |
1 μL |
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模板RNA |
10 pg - 5 μg |
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RNase free ddH2O |
To 20 μL |
（2）42℃，45 min；85℃，5 min。
（3）产物于-20℃保存，如需长期保存请置于-80℃。
