MR0201 T7 RNA聚合酶
Cat. No.：MR0201
来源：重组大肠杆菌表达
储存温度：-20 ± 5℃
复验期：2年
1.产品简介
雅心T7 RNA Polymerase由克隆有噬菌体T7 RNA聚合酶编码基因的重组大肠杆菌生产，对T7启动子有高度的特异性，是一种以DNA为模板合成互补RNA的5'→3' RNA聚合酶。本产品可用双链线性平头末端或5'突出末端DNA为模板，如线性化的质粒或PCR产物。用于制备放射性标记的RNA探针；用于体外转录合成功能性RNA；以含Cap类似物的引物合成加帽的mRNA。
2.产品特性
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来源 |
重组大肠杆菌表达 |
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外观 |
无色澄清液体 |
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活性 |
50 U/μL |
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纯度 |
≥95% |
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酶残留 |
无核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留 |
1单位（U）指在37 ℃条件下，1小时内将1 nmol的ATP掺入酸不溶物所需要的酶量。
3.产品优势
(1)无动物源性：重组生产，生产过程不使用任何动物源原料。
(2)质量稳定：批量生产，可保证稳定连续的批次生产；产品批次间无差异，质量稳定。
(3)质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。
4.产品用途
(1)在体外转录中合成单链RNA，特别是用于mRNA合成。
(2)合成高特异性RNA探针、siRNA前体等。
(3)利用帽类似物合成带帽RNA。
5.应用举例
(1)配制如下反应混合液
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组分 |
用量 |
终浓度 |
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10X Transcription Buffer |
2 μL |
1X |
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NTP（100 mM each） |
1 μL each |
5 mM |
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T7 RNA Polymerase（50 U/μL） |
1 μL |
2.5 U/μL |
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RNase Inhibitor（40 U/μL） |
1 μL |
2 U/μL |
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Template DNA |
0.1 - 1 μg |
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RNase-free ddH2O |
To 20 μL |
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(2)根据反应情况，调整以下参数：
· T7 RNA 聚合酶可在2.5-5 U/μL之间调整，RNase Inhibitor可在1-2 U/μL之间调整。
· 可依据需求，相对应调整NTP和镁离子的浓度。
· RNase Inhibitor可购买本公司相应产品（货号MR0110）。
· 可以加入无机焦磷酸酶以提高产率（货号MR04）。
(3) 37℃反应1-2 h（可根据需求，适当延长反应时间）。
6.注意事项
(1)建议室温下配制反应体系。注意先加入RNase-free ddH2O、Buffer、NTP和T7 RNA Polymerase，DNA模板可最后加入。
(2)使用无RNase管和移液枪；应戴手套。
(3)转录效率和孵化时间：不同模板的产量会因模板的序列、结构、长度、纯度以及特定RNA聚合酶启动子的序列和长度而有所不同。推荐的反应条件可适用于大多数模板的体外转录，对于某些模板可通过延长反应时间，增加模板的用量来提高产率。
7.订购信息
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产品名称 |
货号 |
规格 |
储存条件 |
复验期 |
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T7 RNA Polymerase（50 U/μL） 10X Transcription Buffer（300 μL） |
MR0201-01 |
5000 U（100 μL） |
-20±5℃ |
2年 |
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T7 RNA Polymerase（50 U/μL） 10X Transcription Buffer（1 mL） |
MR0201-02 |
25000 U （500 μL） |
-20±5℃ |
2年 |
注：需要高浓度或大规格可定制。
