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MR0203 T7 RNA聚合酶(高浓度)

Cat. No.:MR0203

来源:重组大肠杆菌表达

储存温度:-20 ± 5℃

复验期:2年

 

1、产品简介

雅心T7 RNA Polymerase由克隆有噬菌体T7 RNA聚合酶编码基因的重组大肠杆菌生产,对T7启动子有高度的特异性,是一种以DNA为模板合成互补RNA的5'→3' RNA聚合酶。本产品可用双链线性平头末端或5'突出末端DNA为模板,如线性化的质粒或PCR产物。用于制备放射性标记的RNA探针;用于体外转录合成功能性RNA;以含Cap类似物的引物合成加帽的mRNA。

 

2、产品特性

来源

重组大肠杆菌表达

外观

无色澄清液体

活性

3 KU/μL

纯度

≥95%

酶残留

无核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留

宿主细胞DNA残留

≤100 pg/mg

宿主细胞蛋白残留

≤50 ppm

 

1单位(U)指在37 ℃条件下,1小时内将1 nmol的ATP掺入酸不溶物所需要的酶量。

 

3、产品优势

1.无动物源性:重组生产,生产过程不使用任何动物源原料。

2.质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产品批次间无差异,质量稳定。

3.质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。

 

4、产品用途

1.在体外转录中合成单链RNA,特别是用于mRNA合成。

2.合成高特异性RNA探针、siRNA前体等。

3.利用帽类似物合成带帽RNA。

 

5、应用举例

1.配制如下反应混合液

组分

用量

终浓度

10X Transcription Buffer

2 μL

1X

NTP (100 mM each)

2 μL each

10 mM

T7 RNA Polymerase (High Concentration)

1 μL

150 U/μL

RNase Inhibitor (40 U/μL)

0.5 μL

1 U/μL

Pyrophosphatase, Inorganic (0.1 U/μL)

0.5 μL

0.0025 U/μL

Template DNA

0.1 - 1 μg

 

RNase-free ddH2O

To 20 μL

 

 

1.根据反应情况,调整以下参数:

· T7 RNA 聚合酶使用浓度可依据需求相对应调整,RNase Inhibitor可在1-2 U/μL之间调整,Pyrophosphatase,Inorganic可在0.001-0.005 U/μL之间调整。

· 可依据需求,相对应调整NTP和镁离子的浓度。

· RNase抑制剂(RNase Inhibitor)可购买本公司相应产品(Cat. No.: MR0110)。

· 可以加入无机焦磷酸酶(Pyrophosphatase,Inorganic)以提高产率(Cat. No.: MR04)。

· 37℃反应1-2 h(可根据需求,适当延长反应时间)。

 

6、注意事项

建议室温下配制反应体系。注意先加入RNase-free ddH2O、10X Transcription Buffer、NTP和T7 RNA Polymerase,DNA模板可最后加入。

使用DNase-free、RNase-free低吸附管;操作过程中应佩戴手套、口罩等。

转录效率和孵化时间:不同模板的产量会因模板的序列、结构、长度、纯度以及特定RNA聚合酶启动子的序列和长度而有所不同。推荐的反应条件可适用于大多数模板的体外转录,对于某些模板可通过延长反应时间,增加模板的用量来提高产率。

 

7、订购信息

产品名称

货号

规格

储存条件

复验期

T7 RNA Polymerase (High Concentration)

10X Transcription Buffer (250 μL)

MR0203-01

300 KU (100 μL)

-20±5℃

2年

T7 RNA Polymerase (High Concentration)

10X Transcription Buffer (1.2 mL×2)

MR0203-02

3 MU (1 mL)

注:需要大规格可定制。

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