CS0401 重组胰蛋白酶细胞消化液

Cat. No.：CS0401

储存温度：-20 ± 5℃保存

复验期：2年

1. 产品描述

　　重组胰蛋白酶是一种无动物来源的重组丝氨酸蛋白酶，可替代提取的猪胰蛋白酶或牛胰蛋白酶。重组胰蛋白酶在氨基酸序列的赖氨酸和精氨酸的C末端进行切割从而使肽键断裂。根据此特性，重组胰蛋白酶被用于贴壁细胞消化、疫苗生产、微载体培养、原代细胞获取、组织块消化液解离、干细胞等应用领域。雅心重组胰蛋白酶是由重组大肠杆菌表达生产，氨基酸序列与猪胰腺来源的胰蛋白酶完全一致。酶切特异性相同。最适pH为7.0-10.0。

2.  使用方法

　　本产品不能用于人体。使用时请穿戴合适的防护用品。请在无菌环境中进行细胞实验，应在入口处去除外包装并搽拭消毒。 

以T75培养瓶为例：

(1) 细胞消化前，可在室温或37℃预热消化液和培养基。

　　注：室温条件下，预热平衡消化液可满足大多数贴壁细胞的消化要求。

(2) 去除细胞培养瓶中的培养基。

(3) 在培养瓶中加入5-10 mL不含Mg2+和Ca2+的PBS或HBSS，清洗贴壁细胞，弃去清洗液。此步骤重复操作2-3次。

(4) 在培养瓶中加入3-5 mL消化液，以确保消化液可以完全覆盖培养瓶细胞底面。

(5) 将培养瓶置于37℃条件下孵育，直至细胞消化完成。

　　注：不同类型的贴壁细胞消化所需时间可能不同，可以选择37℃条件下或室温条件下进行细胞消化。消化期间，可每间隔30-60 s观察细胞形态变化，并伴随用手温和的拍打细胞培养瓶侧壁。当细胞变圆、成片脱落可认为消化完成。

(6) 立即在培养瓶中加入5-10 mL预热的完全细胞培养基，用移液管温和的吹打细胞，将细胞悬液转移至15 mL离心管中。

(7) 100×g离心5-10 min，弃上清。加入已预热完全培养基，进行后续的细胞培养工作。

3.  不同细胞消化时间参考

▪ VERO SCSP-520非洲绿猴肾细胞（SCSP-651 MEM完全培养基）

Table 1：VERO细胞消化时间参考

▪ 293T人胚肾细胞（SCSP-502 DMEM完全培养基）

Table 2：293T细胞消化时间参考

4. 注意事项

(1) 本消化液可在室温条件下消化大多数类型的贴壁细胞。对于较难消化的细胞或需要快速消化的情况，可在37ºC条件下进行预热10-20 min。   

(2) 消化细胞时间不宜过长，须避免消化过度，导致细胞后续培养受到影响。由于细胞类型的差异，细胞消化时的形态可能是细胞逐渐变圆 或细胞收缩间隙变大等多种形态表现。所以建议需根据不同细胞种类确定消化时长，初次使用时可每间隔30-60 s观察细胞形态，并伴随用手温和拍打细胞培养瓶，观察细胞脱壁情况，若成片细胞脱落，可即行终止反应。

(3) 本重组胰酶细胞消化液可在-20ºC长期保存，建议解冻后分装保存。

(4) 在使用本产品的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。

(5) 本产品仅限于专业人员使用。注意防护措施。

5. 应用领域

(1) 组织块消化，原代细胞获取；

(2) 贴壁细胞的传代消化；

(3) 微载体方法培养的细胞消化；

(4) 病毒疫苗生产中的病毒处理；

(5) 干细胞温和消化。

6.雅心细胞消化液优势

(1) 无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原料。

(2) 质量稳定：批量生产，可保证稳定连续的批次生产；产品批次间无差异，质量稳定。

(3) 符合药典标准：所用重组胰蛋白酶原料符合中国药典2020版《重组胰蛋白酶》标准。

(4) 质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。

7. 企业质量体系

上海雅心生物技术有限公司已取得 ISO9001:2015和ISO13485:2016质量体系认证。

8.订购信息 

9.相关产品

试剂盒检测范围：0.078 - 40 ng/mL