V813 重组V8蛋白酶
| 产品规格 | 100ug；1mg；2mg |
CAS：66676-43-5 EC：3.4.21.19
【V8蛋白酶｜产品简介】
酶切位点：V8蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶家族，能特异水解谷氨酸（Glutamic acid、E）或天冬氨酸（Aspartic acid、D）残基羧基侧肽键。在pH 7.8的NH4HCO3和pH 4.0的CH3COONH4缓冲液中识别并切割Glu羧基端肽键，在pH 7.8的磷酸盐缓冲液中识别并切割Glu或Asp羧基端肽键，且对Glu的水解速率高于Asp。
产品应用：在进行蛋白质酶切测序、肽图谱分析和肽质量指纹图谱分析中使用时，可以单独使用或与其他蛋白酶混合使用。
基本特性：V8蛋白酶在pH4.0-10.0之间均有活性，最适pH为8.0-8.5。V8蛋白酶的抑制剂有二异丙基氟磷酸（DFP）、α2-巨球蛋白和Nα-P-甲苯磺酰基-L-赖氨酸氯甲基酮（TLCK）。
【V8蛋白酶｜产品特性】
| 来源 | 重组大肠杆菌 |
| 产品外观 | 白色、类白色、类黄色粉末 |
| 比活 | ≥5.0 U/mg pro. |
| 纯度（蛋白电泳） | 单一主条带 |
| 分子量（蛋白电泳） | 24.0±2.4 kDa |
备注：在25℃，pH7.8的条件下，每分钟催化底物（Z-Phe-Leu-Glu-4-nitranilide）生成1μmol对硝基苯胺（4-nitroaniline）所需要的酶量为一个酶活性单位。
【V8蛋白酶｜使用方法】
使用前注意:可按使用量分装以最大限度避免污染或自切。
目的蛋白溶解:用酶切buffer溶解目的蛋白，例如25-50 mM NH4HCO3 pH 7.8，若溶解度不好对目的蛋白变性，添加尿素、SDS、DTT或加热。尿素和SDS对V8蛋白酶的影响见表一。
酶切:V8蛋白酶和目的蛋白推荐比例为1/20-1/100（W/W)，25℃或37℃酶切2-18h。
表一：V8蛋白酶在含有不同浓度变性剂，尿素25℃2h，SDS25℃12h的稳定性
（注：V8蛋白酶0.5mg/ml，50mM Tris-HCl pH8.0）
| 变性剂 | 浓度 | 残余酶活 |
| 不添加 | 0 | 100% |
| 尿素 | 2M | 95% |
| 5M | 12% | |
| 8M | 0 | |
| SDS | 0.10% | 90% |
| 0.50% | 80% | |
| 1% | 50% |
应用举例：重组V8酶切胰岛素
100 μl胰岛素溶液+198 μl 0.4 M Tris-HCl pH 8.0+60 μl 0.1%V8蛋白酶液+超纯水补至400 μl。37 ℃水浴反应2 h，加6 μl磷酸溶液终止反应，C18柱分析：
A:酶切之前
B:酶切之后
【V8蛋白酶｜储存运输】
储存稳定性：重组V8蛋白酶冻干粉存于2-8℃，24个月稳定；
溶解后稳定性：用水或50 mM Tris-HCl pH 8.0溶解以后存于-20℃ 以下（1mg/ml），6个月稳定；用水或50 mM Tris-HCl pH 8.0溶解以后存于4℃（1mg/ml，无菌），2个月稳定；用50 mM Tris-HCl pH 8.0溶解以后存于25℃或37℃（0.5mg/ml）12h，活性可维持85%以上；溶解后溶液可反复冻融10次无活性损失。
运输稳定性：蓝冰保温运输，活性稳定。
【V8蛋白酶｜产品优势】
序列分析纯胰蛋白酶：特异性高，稳定性好。
无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定：批量生产，可保证稳定连续的批次生产；产品批次间无差异，质量稳定。
纯度高：比活高；宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
冻干粉：易于储存和运输。
符合法规要求：生产设备和生产环境符合相关法规要求，生产过程完全遵循NSF ISO 9001:2015质量体系并符合GMP指导原则。
质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。
【V8蛋白酶｜相关产品】
重组肠激酶；序列分析纯羧肽酶B；序列分析纯胰蛋白酶；序列分析纯糜蛋白酶。
