重组肠激酶在25℃下的稳定性

一、试剂:

试剂A: 25 mM Tris HCl Buffer, pH 8.0 at 25°C (称取Tris 0.303gr, 溶解在80ml 纯化水中， 25°C，用2mol/LHCl 调pH 8.0，加纯化水至100ml.)  

试剂B. 重组肠激酶酶液 

REK161101 (10U/µl, 1kU/支)，于25°C，室温保存.

试剂C. 底物溶液

底物蛋白溶液: 50μg/支, 1mg/ml, 储存在 -80°C.

二、操作步骤：

a.REK酶液25℃下放置，分别于放置的第1、2、3、5、7天测活。

b.按《重组肠激酶检验标准操作规程》测定酶活。如下：用试剂A稀释REK 溶液至0.1 unit /μl，取1 µl 至底物溶液中50µl (50μg/支, 1mg/ml).混匀，25 °C酶切14-16h, SDS-PAGE分析酶切结果。 

三、实验结果：

Fig. 1 REK 溶液 25℃保存稳定性

Lane 1, 底物; Lane2-6酶切结果：Lane2, 1d; Lane 3, 2d; Lane 4, 3d; Lane5, 5d; Lane 6, 7d.  

四、结论:  

REK溶液 25℃ 放置7天内稳定。