1)如何溶解重组胰蛋白酶冻干粉?
使用50mM HAc 溶解或稀释。
2)使用时,溶解液和最适pH缓冲溶液?
使用时,按照使用终浓度直接稀释在50mM NH4HCO3 或者ph7-8的酶切缓冲溶液中(含有目的酶切蛋白)。
3)酶切缓冲液中酶和底物的比例是多少?
在酶切缓冲液中建议使用1mM CaCl2,重组胰蛋白酶:目的蛋白=1:20-1:100。
4)酶切时的缓冲液最适pH?
最适pH为7.0-8.0的缓冲液,通常用50mM NH4HCO3或者Tris-HCl。
5)溶解后溶液如何保存?如果反复冻融,稳定性如何?